王丝菲曾就读南京艺术学院表演系，扎扎实实啃了几年服装设计与展示专业。在舞蹈老师马晓林的推荐下，毕业后来到东方天艺影视艺术学院任教。出色地表现，又深得东方天艺影视艺术学校校长的欣赏。通过老师的鼓励，报考了北京电影学院。第二年，王丝菲顺利考入北京电影学院。
2005年参演动作武打连续剧《功夫散打王》。同年参演根据王西萍小说《胭脂红》改编的电影《西凉外的风车》。
2007年主演的电影《》获2007年中国大学生电影节“最佳处女作”奖、获2007年上海国际电影节“亚洲新人奖”及“亚洲大学生最喜欢电影”。